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高速離心機是如何分離真菌菌絲體的?

  高速離心機屬常規(guī)實驗室離心機,廣泛用于生物,化學,醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門,適用于微量樣品快速分離合成。速度的劃分線為10000r/min-30000r/min,離心機轉(zhuǎn)速≥10000r/min的稱為高速離心機,所有的高速離心機轉(zhuǎn)速都是在10000r/min以上。
  高速離心機轉(zhuǎn)速可達10000rpm以上,具有常溫高速離心機和高速冷凍離心機。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料制品。這類離心機多用于收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。
  高速離心機分離真菌菌絲體的方法如下:
  1.用高速離心機將六種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物分別置于離心管中,在20℃8000r/min條件下離心10min,分離上清液,收集的菌絲體置于培養(yǎng)皿中。
  2.減壓抽濾法六種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物分別用抽濾裝置進行常溫減壓抽濾將菌絲體與發(fā)酵液分開。菌絲體保留在濾紙上,發(fā)酵液流入收集瓶中。
  3.多層紗布過濾法將折疊八層后的紗布放在培養(yǎng)皿中,分別將6種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物平攤于紗布,操作者戴無菌乳膠手套,將紗布細心卷起,雙手反向擰緊紗布,使發(fā)酵液與菌絲體分離,待無液體流下時,輕輕展開紗布,收集菌絲體。
  測定方法:
  1.分生孢子計數(shù)用血球計數(shù)器將真菌的孢子懸浮液在顯微鏡下計數(shù)。
  2.菌絲體含水率菌株培養(yǎng)一定時間后,分別取不同菌種的發(fā)酵產(chǎn)物100 ml,采用高速離心、真空抽濾和紗布過濾三種方法收集菌絲體,準確稱量菌體濕重(g),然后將菌體在105℃下烘干至恒重,精確稱量干重。
  3.高速離心法分離的菌絲體與發(fā)酵液采用高速離心法將真菌的發(fā)酵產(chǎn)物離心后,六種真菌均表現(xiàn)為菌絲體與發(fā)酵液分離,形成絮狀或松散沉淀。用移液器將上清液分離后,將菌絲體置于培養(yǎng)皿中發(fā)現(xiàn),由于菌絲體很輕(只有球毛殼菌的菌絲球堅硬),并且發(fā)酵液粘稠,導致離心后收集的菌絲體中仍含有少量發(fā)酵液。
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